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高濃度HC Matrigel基底膜基質(zhì)膠

更新時(shí)間:2017-09-08點(diǎn)擊次數(shù):1279

BD產(chǎn)品貨號(hào)354248  354262

儲(chǔ)存和運(yùn)輸-20℃儲(chǔ)存,干冰運(yùn)輸。

產(chǎn)品特性

Matrigel基質(zhì)會(huì)有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后即會(huì)減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。

細(xì)胞可在0.5 mm厚度的Matrigel基質(zhì)層表面生長(zhǎng),也可在1 mm厚度的Matrigel三維基質(zhì)內(nèi)生長(zhǎng)。過(guò)度稀釋的Matrigel會(huì)形成非膠質(zhì)的蛋白層,可以用于細(xì)胞貼壁,但不能用于細(xì)胞的分化研究。

注意:可將凍融后的Matrigel分裝在多個(gè)小管,所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

Matrigel25-35溫度環(huán)境下快速成膠,因此溶解時(shí)在4冰上過(guò)夜凍融(4度時(shí)會(huì)隨著溫度的上升部分成膠)。成膠后的Matrigel可以在4 24-48小時(shí)后重新呈液態(tài)。

注射步驟:

注射前,必須保證Matrigel細(xì)胞懸浮液在不冷凍的情況下,盡可能地保持低溫,同時(shí)保證每一步都無(wú)菌操作。對(duì)于每只注射小鼠,冰上混合0.5 mL細(xì)胞(2×105或更多細(xì)胞)和 Matrigel混合液。細(xì)胞注射體積需盡可能小。通常,用含有2×106/mL細(xì)胞的250 μL預(yù)冷培養(yǎng)基,混合250 μL冰浴的Matrigel。小鼠皮下注射,19G針用于組織樣品,23G針用于培養(yǎng)的細(xì)胞。注射動(dòng)作必須快速,以避免Matrigel凝固。抽出注射器時(shí)旋轉(zhuǎn)以防止泄漏。針頭需要經(jīng)常更換以避免堵塞。用BD細(xì)胞回收劑(354253)或離散酶(354235)可降解Matrigel基質(zhì),冰浴7小時(shí)后回收得到細(xì)胞。

 

 

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